超微量分光光度計是現代分子生物實(shí)驗室常規使用儀器，在生命科學(xué)實(shí)驗室應用廣泛，但是我們必須了解一下分光光度計的一些使用限制，這樣才不會(huì )出現失誤或者產(chǎn)生危險。

　　在說(shuō)使用限制之前，我們先來(lái)了解一下超微量分光光度計的工作原理是物質(zhì)對光的選擇吸收和瑯伯-比爾定律。，超微量分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器，常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長(cháng)濃度的定量。

　　論瑯伯-比爾定律的限制性條件：

　　其一：通過(guò)溶液的光必須是平行的；

　　其二：通過(guò)溶液的光必須是單色光；

　　其三：待測溶液必須是純凈的、均勻的且濃度不宜過(guò)高，這是瑯伯-比爾定律首要的三個(gè)前提條件。

　　在實(shí)際的分光光度計的制造和使用過(guò)程中這三個(gè)條件是不可能達到的：

　　其一：因為光是直線(xiàn)傳播的，在分光光度計制造過(guò)程中，燈源發(fā)出的光是發(fā)散的，經(jīng)過(guò)聚焦鏡進(jìn)行聚焦等直到經(jīng)過(guò)溶液的整體過(guò)程中，光是不可能平行的。

　　其二：燈源發(fā)出的光是復合光，經(jīng)過(guò)狹縫，再經(jīng)過(guò)光柵分光等步驟，因為受到狹縫和光柵本身的限制，光柵分光不可能達到純單色光。還有光度計的整體設計問(wèn)題，光度計不可能沒(méi)有其它的雜光存在。

　　其三：用戶(hù)的溶液也不可能是純凈的，也會(huì )含有一些雜質(zhì)，這些對光度的吸收都會(huì )存在影響。除以上三個(gè)方面的影響外，在實(shí)際的光度計應用過(guò)程中還會(huì )存在其他因素的影響，例如：

　　1、經(jīng)過(guò)比色皿的光是否垂直；

　　2、比色皿寬度是否為10mm的標準值；

　　3、測試波長(cháng)是否準確；

　　4、程序設計是否存在漏洞等等，都會(huì )直接影響到利用瑯伯-比爾定律計算出的結果。

　　所以在日常的測試過(guò)程中，得出的結果和瑯伯-比爾定律有些偏差是很正常的，只是我們關(guān)注偏差多少的問(wèn)題。

　　關(guān)于超微量分光光度計的使用限制就給大家介紹到這里了，更多超微量分光光度計資訊請繼續關(guān)注寶予德。